人脂联素原核表达纯化及活性检测

作者: 王云龙 [1,2] ; 李永超 [1] ; 昌静峰 [3] ; 李玉林 [3] ; 王国强 [3] ; 邓黎黎 [3] ; 陈冬焕 [3] ; 董彩文 [3] ; 孙新城 [3] ; 刘旺根 [3] ; 梁晓艳 [3]

关键词: 人脂联素原核表达免疫活性

摘要：为了克隆人脂联素基因（ACRP30）,获得有免疫活性的重组人脂联素,以人皮下脂肪组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR得到ACRP30基因。构建重组质粒pET-CKS-ACRP30,转化表达菌BL21（DE3）,以IPTG诱导表达人脂联素重组蛋白,利用镍亲和层析纯化,Western blot鉴定其活性,双抗体夹心法检测其免疫活性。获得了人脂联素基因,表达纯化了人脂联素融合蛋白,融合蛋白分子质量约为50ku,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯度达到90%,双抗体夹心法检测重组蛋白具有免疫活性。本研究成功表达了人脂联素重组蛋白且表达产物具有免疫活性,为人脂联素检测技术的建立奠定了基础。

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人脂联素原核表达纯化及活性检测

作者: 王云龙 [1,2] ; 李永超 [1] ; 昌静峰 [3] ; 李玉林 [3] ; 王国强 [3] ; 邓黎黎 [3] ; 陈冬焕 [3] ; 董彩文 [3] ; 孙新城 [3] ; 刘旺根 [3] ; 梁晓艳 [3]

关键词: 人脂联素 原核表达 免疫活性

关键词: 人脂联素原核表达免疫活性