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三黄鸡α干扰素的克隆、表达及抗病毒活性初步研究
作者: 李秋霞 [1] ; 刘永录 [1,2] ; 龚剑 [1] ; 马仲彬 [1] ; 陈乃壮 [3] ; 杨明锋 [1] ; 张国祖 [1,2]
关键词: 鸡α干扰素 原核表达 抗病毒活性
摘要：采用PCR方法从三黄鸡血液基因组中扩增鸡α干扰素全基因,并克隆和测序。序列分析表明,基因全长为582bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489bp。将该片段与表达载体pET-28a连接克隆至大肠埃希菌DH5α菌株,经测序和酶切鉴定,选取正向插入、读码框正确的阳性克隆。构建重组质粒并转化BL21（DE3）,经IPTG诱导,融合蛋白以包涵体形式在BL21（DE3）高效表达,经His亲和层析柱得以纯化。鸡胚试验表明,重组干扰素抵抗新城疫病毒效果显著,能保护鸡胚并能够延迟和减少新城疫病毒的复制。