空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫原性分析

作者: 祝长青 [1,2] ; 唐泰山 [1,2] ; 王婷 [3] ; 蒋原 [1] ; 姚火春 [2] ; 张常印 [1] ; 薛峰 [1] ; 栾军 [1]

关键词: 空肠弯曲菌 peb1A 原核表达免疫原性

摘要：根据空肠弯曲菌基因序列设计引物,以菌株ATCC 29428为模板扩增出peb1A基因片段,定向克隆至pMD18-T载体中,并对克隆片段测序,比较所测序列与不同来源弯曲菌的同源性;用软件改造并合成peb1A基因78 bp~780 bp区间片段,PCR扩增后,构建出表达载体pET-28a（＋）-peb1Ag,转化至E.coliBL21（DE3）后诱导表达,纯化后获得重组蛋白PEB1;将其进行Western blot分析、小鼠免疫试验。结果表明,克隆的peb1A基因序列与报道的NCTC 11168核苷酸同源性为98.1%,改造表达后的重组蛋白PEB1具有良好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠后血清效价达1∶12 800,为空肠弯曲菌保护性抗原的研究和单克隆抗体的筛选奠定了基础。

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空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫原性分析

作者: 祝长青 [1,2] ; 唐泰山 [1,2] ; 王婷 [3] ; 蒋原 [1] ; 姚火春 [2] ; 张常印 [1] ; 薛峰 [1] ; 栾军 [1]

关键词: 空肠弯曲菌 peb1A 原核表达 免疫原性

关键词: 空肠弯曲菌 peb1A 原核表达免疫原性