水牛MD-2 cDNA基因的克隆与原核表达

作者: 焦寒伟 [1] ; 杜丽 [1] ; 雷明 [1] ; 张冬琳 [1] ; 郝永昌 [1] ; 张晓茹 [2] ; 匡文华 [2] ; 成鹰 [1] ; 王凤阳 [1]

关键词: 水牛 MD-2 克隆原核表达

摘要：为探讨水牛抵抗革兰阴性菌感染的免疫机制,克隆、表达了水牛髓样分化蛋白-2（bMD-2）基因,并用Western blot进行鉴定。采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞中扩增bMD-2基因,构建pET28a-bMD-2表达载体,转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,bMD-2基因含有一个483 bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;37℃条件下,经1 mmol/LIPTG诱导表达6 h后,His-bMD-2在E.coliBL21中表达量最高,并以包涵体的形式存在,融合蛋白的分子质量约为25 ku。结果表明水牛MD-2原核表达载体成功构建并表达,为继续深入对水牛MD-2基因功能的研究提供参考。

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水牛MD-2 cDNA基因的克隆与原核表达

作者: 焦寒伟 [1] ; 杜丽 [1] ; 雷明 [1] ; 张冬琳 [1] ; 郝永昌 [1] ; 张晓茹 [2] ; 匡文华 [2] ; 成鹰 [1] ; 王凤阳 [1]

关键词: 水牛 MD-2 克隆 原核表达

关键词: 水牛 MD-2 克隆原核表达