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抗氯霉素单克隆抗体的制备及其化学发光酶免疫法的建立
作者: 张启模 [1,2,3] ; 杨妹 [2] ; 马玲 [3] ; 马玉媛 [2] ; 郭逸 [2] ; 章金刚 [2] ; 吴健敏 [1,3]
关键词: 氯霉素 单克隆抗体 化学发光免疫分析
摘要:以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白(CAP-HS-BSA)免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术获得了一株分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP-McAb)的杂交瘤细胞5D7,并对其进行效价、亲和力和特异性测定。结果显示,其分泌的抗体亚类为IgG1,间接ELISA检测细胞培养上清效价为1∶512,诱生的腹水经纯化后效价为1∶2×10^5,亲和常数为3.6×10^8L/mol;应用上述单抗建立的检测氯霉素的化学发光酶免疫分析法(ci-CLIA),其检测范围为0.001μg/L~10μg/L,检出限达0.0025μg/L,IC50为39.6μg/L,且与L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、青霉素、四环素、庆大霉素等的交叉反应率均小于0.01%,可满足我国对水产品中氯霉素残留检测的要求。