猪附红细胞体培养方法及药敏试验研究

摘要：为实现抗猪附红细胞体药物的高通量筛选,拟建立稳定可靠的体外培养方法,并应用其进行药敏试验。采用单因素试验法,分别对培养基种类、胎牛血清添加比例、动物红细胞泥种类、换液和传代间隔时间进行考察。应用建立的方法对猪附红细胞体进行体外培养,并以贝尼尔、青蒿素作为阳性对照药物,对咪唑苯脲、四环素、强力霉素等8种药物进行药敏试验。结果显示,RPMI-1640基础培养液与胎牛血清按6∶4比例混合,同时添加2 g/L比例的肌苷,并用HEPES和NaHCO3调节pH至7.2~7.4,猪附红细胞体体外生长状况良好。以正常兔红细胞泥为体外培养载体,每24 h更换1次培养液,每32 h传代1次,可连续稳定传代42次,红细胞最高感染率达93.6%。测得咪唑苯脲的IC50最小,为14.55μg/mL,表明在8种药物中,其抗猪附红细胞体活性最强。