- · 【植保学院】多措并举保障留校学生过温馨年[02/18]
- · 【资环学院】举办留校学子新春趣味运动会[02/16]
- · 【信息学院】制作专属微信红包封面[02/13]
- · 【创新学院】新春送祝福温暖学子心[02/12]
- · 【资环学院】新春慰问暖人心 浓浓关爱显真情[02/12]
- · 【学生处】因为有你们才“最美”[02/10]
- · 【园林学院】《中国新疆之历史印记》纪录片引发师生关注[02/08]
- · 【农学院】整合资源引企入教 扎实推进人才培养[02/08]
黄粉甲抗冻蛋白AFP84a原核表达条件的优化和纯化
作者: 闫清华 [1] ; 康静 [1] ; 杨理 [2] ; 邵强 [3]
关键词: 抗冻蛋白 表达条件 优化 亲和纯化
摘要:为纯化黄粉甲抗冻蛋白AFP84a,对已构建的重组大肠埃希菌TBI诱导表达,对诱导温度、初始菌浓度I、PTG浓度及诱导时间等表达条件进行优化后,纯化该重组蛋白。通过分析比较,建立了目的蛋白表达的最优条件:温度25℃,初始菌OD600=0.6;IPTG终浓度0.5 mmol/L,时间8 h。SDS-PAGE及Bandscan4.3软件分析表明,融合蛋白含量超过总可溶蛋白的40%。融合蛋白经Amylose柱亲和纯化,Factor Xa酶切,电泳显示获得的目的蛋白呈单一条带。本研究结果为进一步对抗冻蛋白的性质和应用研究提供了有用的实验材料。