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实时荧光定量PCR检测猪病料中的PRRSV与CSFV
作者: 陈钟鸣 [1] ; 张志成 [1] ; 方光远 [1]
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 实时荧光定量PCR 重组质粒 标准曲线
摘要：根据GenBank发表的PRRSV、CSFV基因核苷酸序列,应用Primer 5.0软件分别设计了2对特异性引物。以重组质粒作为阳性标准品,应用SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测两种病毒的核酸含量。在样品稀释到10-1～10-11拷贝时,能得出良好的线性关系,相关系数为R2=0.999 8。用此法检测猪细小病毒（PPV）、伪狂犬病毒（PRV）,结果均为阴性。建立了PRRSV、CSFV的标准曲线。该方法具有线性关系好、特异性强、敏感性高、重复性好等特点,为分析PRRSV、CSFV共感染猪体内病毒的含量提供了有效地检测方法。